ANTI-FLAG (DYKDDDDK) Agarose 4FF
货号：KTSM2424
规格：{{info.Specification}} ({{info.Specifications}})
储存条件：4~8 ℃（避免冻存）
保质期：12个月
运输：冰袋运输
ANTI-FLAG (DYKDDDDK) Agarose 4FF填料.pdf
联系电话
4009963188
促销价:{{info.PromotionPrice}} 价格:{{info.Price}}
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产品说明
Flag-tag是8个氨基酸残基(DYKDDDDK)组成的多肽，常用的形式有Flag和3 x Flag，通常连接在蛋白的N端或C端融合表达。本填料是Flag抗体与琼脂糖珠偶联制备而成，可特异性结合含Flag标签的融合蛋白（体内/体外表达），可广泛应用于原核、真核表达的蛋白纯化实验中。
产品属性
粒径：45-165 μm（4%交联琼脂糖珠）
耐压：0.3 MPa
偶联物：重组表达Flag抗体（融合6 x his/strep标签），纯度>95%
特异性：适用于N-端、MET-N端和C-端Flag、3 x Flag融合蛋白
结合能力：每1 mL Anti-Flag Agarose 4FF填料可结合约3-5 mg含Flag/3 x Flag的融合蛋白
储存液：1xPBS，25% glycerol和0.02% NaN3
常见问题
洗脱用Flag peptide该选哪一种
根据我们的测试，1 x Flag peptide和3 x Flag peptide在洗脱效率上没有很明显的区别，两者可自由选用，推荐根据自己蛋白的洗脱效率增加peptide的浓度，通过梯度洗脱来提高洗脱效率。
该选用哪种洗脱方式
不同的蛋白洗脱效率会有差异，需要根据纯化蛋白的后续应用和洗脱效果来确定洗脱方式，若对活性要求高，推荐先用1 x Flag peptide / 3 x Flag peptide洗脱，再用甘氨酸洗脱，两种方法联用能保证最大的洗脱效率。
目的蛋白洗脱困难
使用中偶发目的蛋白洗脱效率非常差，几乎全部结合在柱子上，可能原因有几种，一是蛋白沉降变性，导致无法洗脱，二是结合太紧密，洗脱困难，可改变纯化buffer体系、提高buffer中盐浓度、增加去污剂等方式尝试，或更换纯化标签。
填料为什么需要再生
使用后的填料不能保证蛋白完全洗脱，会影响后续纯化蛋白的效率及杂蛋白污染，需要完全去除上一次的蛋白后再使用，NaOH为推荐再生溶液，浓度可以根据实际再生效果调整，推荐使用浓度在10-100 mM范围内，处理时间不超过5 min。再生会使填料结合效率下降，再生操作建议不超过5次。
纯化后有杂带
杂带是所有纯化方式中都存在的现象，一般可以通过提高盐浓度（本产品可耐受1 M NaCl）或增去污剂如 Triton X-100等来降低非特异性结合，也可通过后续处理如离子柱、分子筛等去除杂带。
Flag 标签位置有什么要求
从我们的测试结果看，Flag标签放在N端或C端都不影响结合，单个Flag序列足以满足纯化需求，但不同的蛋白结构或许会对结合有影响，需要根据蛋白的自身特性去探索Flag标签放在不同位置的影响。
填料耐受性
本产品对常见分子生物学缓冲液耐受。耐4 M盐酸胍，耐6 M尿素，但这些存在会影响结合，不推荐纯化体系中添加这些试剂。DTT、β-巯基乙醇等不超过2 mM。
本产品是否可以做COIP之类的实验
本产品开发主要目的是做蛋白纯化，未验证COIP等实验流程，如果有这方面需求，推荐选用本公司专门针对IP、COIP实验开发的纳米抗体beads产品。
实验过程中请全程佩戴手套
下单平台
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