纳米抗体技术
Nanoantibody Discovery
羊驼骆驼免疫
羊驼基地
免疫服务流程
抗原乳化
01
根据抗原体积加入等体积的弗氏佐剂充分混匀进行乳化。性状:乳白色乳剂，滴水不扩散
免疫
02
采血部位：颈部淋巴结附近左右两侧
免疫前乳剂要恢复至室温免疫后观察羊驼状态良好无不适症状。
免疫部位:颈部淋巴结附近左右两侧
PBMC分离
03
采集50 mL血液分离外周血单个核细胞，并保存于RNAiso Plus中
免疫周期表
| 免疫操作 | 时间节点 | 常规采血/免疫剂量 | 免疫方式 | 佐剂 |
|---|---|---|---|---|
| 免疫前采血 | 第0-2天 | 采血(5 mL) | / | / |
| 初次免疫 | 第0-2天 | 500 μg | 颈部淋巴结附近左右两侧注射 | Sigma Adjuvant |
| 二次免疫 | 第17天 | 500 μg | 颈部淋巴结附近左右两侧注射 | Sigma Adjuvant |
| 三次免疫 | 第31天 | 500 μg | 颈部淋巴结附近左右两侧注射 | Sigma Adjuvant |
| 四次免疫 | 第45天 | 500 μg | 颈部淋巴结附近左右两侧注射 | Sigma Adjuvant |
| 血清滴度测定PBMC分离 | 第52天 | 采血(50 mL) | / | / |
四次免疫后抗体效价检测
| 稀释倍速 | 未免 | 一免 | 二免 | 三免 | 四免 |
|---|---|---|---|---|---|
|
2000 |
0.066 |
0.551 |
1.251 |
2.338 |
3.968 |
|
4000 |
0.065 |
0.377 |
0.771 |
1.422 |
3.096 |
|
8000 |
0.059 |
0.293 |
0.469 |
0.99 |
2.301 |
|
16000 |
0.061 |
0.219 |
0.354 |
0.673 |
1.724 |
|
32000 |
0.059 |
0.129 |
0.245 |
0.461 |
1.157 |
|
64000 |
0.067 |
0.093 |
0.103 |
0.321 |
0.741 |
|
128000 |
0.061 |
0.068 |
0.072 |
0.189 |
0.445 |
|
blank |
0.054 |
0.064 |
0.04 |
0.1 |
0.189 |
实验结果分析和讨论
① 羊驼在一至四次免疫后抗体效价依次增高，表明其针对抗原产生的免疫应答随免疫次数逐渐增强
② 第四次免疫后免疫效价达到105，符合建库标准，可以对羊驼进行采血分离PBMC并进行后续实验
交付内容:
① 抗体效价检测报告
② 每次免疫后的血浆
③ 保存在Trizol中的PBMC(外周血单个核细胞)
合作单位
