SF-TOP10超级快速转化感受态细胞
货号：KTSM131SL
规格：{{info.Specification}} ({{info.Specifications}})
储存条件：-80℃
保质期：6个月
运输：干冰运输
【KTSM131SL】SF-TOP10 说明书.pdf
联系电话
4009963188
促销价:{{info.PromotionPrice}} 价格:{{info.Price}}
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基因型
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1nupG
产品说明
TOP10 菌株来源于 MC1061，是实验室最常用的感受态细胞之一，基因型与 DH10B 高度类似 (DH10B 为 galE15型，而 TOP10 为 galU 型)。TOP10 生长速度快，37℃，10 小时可见克隆。recA1 和 endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。可用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验。SF-TOP10 感受态细胞经特殊工艺制作，无需42℃热激，37℃孵育步骤，只需冰浴，10min 内完成转化、涂板操作，pUC19 质粒（2686bp，Amp R）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
注意事项
1. 刚刚化冻的细胞，转化效率最高，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率，混入目的 DNA 时应轻柔操作。
2. 避免反复化冻，化冻没用完的感受态细胞不可留做下次使用。
3. 整个操作过程要轻柔，避免移液枪吹吸，加入质粒后用手指轻弹管壁混匀。
4. 重组产物不建议用10分钟快速转化法，对于>7 kb 质粒的构建，为了提高转化效率可按以下步骤操作：SF-TOP10 感受态细胞从-80℃拿出，插入冰中，5 分钟后，加入目的 DNA 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰中静置 30 分钟。42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰中静置 2 分钟。加入 700 μl LB，37℃，200 rpm 复苏 30 分钟，涂板。
5. SF-TOP10 快速转化感受态细胞涂氨苄/羧苄青霉素抗性平板时效率较高，若涂卡那霉素或其他抗生素平板，转化效率下降(因无孵育步骤，卡那霉素等对菌体毒性较大)，若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率，可增加孵育步骤
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