SF-DH5α 超级快速转化感受态细胞
货号:KTSM130SL
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储存条件:-80℃
保质期:6个月
运输:干冰运输
【KTSM130SL】SF-DH5α 说明书.pdf
联系电话
4009963188
促销价:{{info.PromotionPrice}} 价格:{{info.Price}}
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基因型
F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk- ,mk+ ) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA
产品说明
DH5α 菌株是实验室最常用的感受态细胞。缺失核酸内切酶(endA), 提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;lacZΔM15 的存在使DH5α 可用于蓝、白斑筛选。SF-DH5α 感受态细胞经特殊工艺制作,无需 42℃热激、37℃孵育步骤,只需冰浴,10min 内完成转化、涂板操作,pUC19质粒检测转化效率 >10⁸ cfu/μg DNA。
注意事项
1. 刚刚化冻的细胞,转化效率最高,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率,混入目的 DNA 时应轻柔操作。
2. 避免反复化冻,化冻没用完的感受态细胞不可留做下次使用。
3. 整个操作过程要轻柔,避免移液枪吹吸,加入质粒后用手指轻弹管壁混匀。
4. 重组产物不建议用10分钟快速转化法,对于>7 kb 质粒的构建,为了提高转化效率可按以下步骤操作:SF-DH5α 感受态细胞从-80℃拿出,插入冰中,5 分钟后,加入目的 DNA 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,冰中静置 30 分钟。42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰中静置 2 分钟。加入 700 μl LB,37℃,200 rpm 复苏 30 分钟,涂板。
5. SF-DH5α 快速转化感受态细胞涂氨苄/羧苄青霉素抗性平板时效率较高,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,转化效率下降(因无孵育步骤,卡那霉素等对菌体毒性较大),若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率,可增加孵育步骤