感受态细胞BL21(DE3) pGRO7
货号：KTSM113L
规格：{{info.Specification}} ({{info.Specifications}})
储存条件：-80℃
保质期：6个月
运输：干冰运输
【KTSM113L】BL21(DE3) pGRO7 Chaperone Competent Cell说明书.pdf
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4009963188
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产品说明
BL21(DE3) pGRO7 Chaperone Competent Cell是由转化了伴侣蛋白质粒pGRO7的Escerichia coli BL21制成的感受态细胞。分子伴侣参与蛋白质折叠过程，且人们已经通过大量的实验研究来表明体内蛋白折叠机理。本制品中含有的pGRO7质粒，能有效表达一种具有协同作用、共同参与蛋白折叠的分子伴侣。靶蛋白与分子伴侣共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收比率，而用常规方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可纯化的。该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体 RNA 聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达。
当进行与靶蛋白的共表达实验时，通常需要三步：
1.用伴侣蛋白质粒转化宿主 E.coli；
2. 用转化体制备感受态细胞；
3. 用质粒转化感受态细胞并表达靶蛋白。
如果使用本产品，只需一步转化就可构建共表达体系，因为使用的E.coli BL21（DE3） 感受态细胞已转化有伴侣蛋白质粒。
操作方法
1. 感受态细胞使用前在冰中融化。
2. 细胞融化后，轻柔混合均匀，取 100 μl 移入离心管中（避免剧烈振荡）。
3.加入目的蛋白质表达用质粒（≤10 ng）。
4.冰浴30分钟，42℃放置45秒，再冰浴1-2分钟。
5.加入37℃预温的SOC培养基达到终体积1ml。
注意事项
1. 从-80℃中只取出实验所用的感受态细胞，然后立即放入冰中。
2. 使用 100 μl 感受态细胞转化时，高纯度 DNA 使用量不要超过 10 ng，否则转化效率会降低。
3. 除 SOC 培养基外，L-broth 及φb-broth 也可使用，但转化效率会有所下降。
4. 请使用加chl的培养基筛选，例如导入的表达质粒为氨苄抗性，需要使用chl+amp双抗板筛选
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