感受态细胞BL21(DE3) CodonPlus-RIPL
货号：KTSM112L
规格：{{info.Specification}} ({{info.Specifications}})
储存条件：-80℃
保质期：6个月
运输：干冰运输
【KTSM112L】BL21(DE3) CodonPlus-RIPL Chemically Competent Cell 说明书.pdf
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4009963188
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产品说明
BL21(DE3) CodonPlus-RIPL菌株含有pACYC 质粒，补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子(AGA,AUA, CCC, CUA)对应的tRNA (argU, ileY, proL, leuW)，提高外源基因，尤其是富含 AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体 RNA 聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素，壮观霉素抗性。BL21(DE3) CodonPlus-RIPL感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>108cfu/μg DNA。
操作方法
1. 从-80℃冰箱取出感受态细胞，冰浴5min, 融化后吸取100uL，加入目的质粒（连接产物）,轻轻混匀，冰浴25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，该过程不要摇动。
3. 向离心管中加入700μL2YT 或LB无菌培养基（不含抗生素），37℃、200rpm/min、60分钟培养复苏。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含34 µg/ml 氯霉素及所选质粒筛选抗生素的2YT或LB培养基上。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。
注意事项
1. 刚刚化冻的细胞，转化效率最高。
2. 避免反复化冻。
3. 避免移液枪吹吸。
4. 整个操作过程要轻柔。
5. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
6. BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL 菌株携带 pACYC 质粒，除复苏培养基为无抗生素外，其余所用培养基、培养液均应含有 34 µg/ml 氯霉素，以防质粒丢失。
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